การพัฒนาวิธีการตรวจวัดระดับไมโครอัลบูมินและครีแดทินินในปัสสาวะในระบบของไหลจุลภาคแบบพกพา

Abstract

ระบบของไหลจุลภาคแบบง่าย ต้นทุนต่ำ ขนาดเล็ก และพกพาได้ สำหรับตรวจวัดระดับไมโครอัลบูมินและครีแอทินินในปัสสาวะ ได้ถูกพัฒนาขึ้น โดยใช้หลักปฏิกิริยาการเกาะกลุ่ม และวิธีอัลคาไลน์พิเครทแบบไคเนติก (แจฟฟี) สำหรับตรวจวัดไมโครอัลบูมินและครีแอทินินตามลำดับ ไมโครชิปที่สร้างจากโพลีไดเมธิลไซลอกเซน (พีดีเอ็มเอส) ถูกออกแบบให้มีท่อทางเข้ารูปตัววาย โดยมีความกว้างของท่อ 500 µm และมีความลึก 100 µm สำหรับเป็นทางเข้าของน้ำยา (100 µL) และสิ่งตัวอย่าง (5 µL) และในบริเวณผสมสาร ได้มีการสร้างสิ่งกีดขวางขนาดเล็กภายในท่อเป็นรูปหัวลูกศร (arrowhead-shaped baffles) เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการผสมระหว่างน้ำยาและสิ่งตัวอย่าง ในบริเวณที่ใช้ติดตามการเกิดปฏิกิริยา ได้มีการประยุกต์ใช้โพลีสไตรีนคิวเวตต์ (ระยะแสงผ่าน 10 mm, ปริมาตร 90 µL) และใช้ไฟเบอร์ออฟติกสเปคโตรมิเตอร์ สำหรับติดตามปฏิกิริยา การเกาะกลุ่ม และปฏิกิริยาแจฟฟี ที่ความยาวคลื่น 500 และ 510 nm ตามลำดับ ผลการทดลองพบว่า การตรวจวัดปริมาณไมโครอัลบูมิน มีช่วงความเป็นเส้นตรง 0-10 mg/L (r2 =0.993) และค่าต่ำสุดที่ตรวจวัดได้คือ 0.81 mg/L ส่วนช่วงความเป็นเส้นตรงของการตรวจวัดปริมาณครีแอทินินคือ 0-40 mg/L (r2 = 0.997) และค่าต่ำสุดที่ตรวจวัดได้คือ 3.27 mg/L เมื่อทำการวิเคราะห์ปัสสาวะจากผู้ป่วยโรคเบาหวานพบว่าระบบของไหลจุลภาคที่นำเสนอในงานวิจัยนี้ เมื่อนำไปใช้ตรวจวัดอัตราส่วนระหว่างไมโครอัลบูมินและครีแอทินิน พบว่ามีความสัมพันธ์ดีกับวิธีที่ใช้ทั่วไปในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ (r2 = 0.985, n = 15)